含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的概述
【摘要】近年来,中医制药愈发受到医学者的重视和青睐,许多西药之中也包含着中药药材的成分。此次,我研究综述的内容为含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的研究动态,为今后制药业中含黄芪制剂类药物的成分检测与质量标准提供数据参考与建议。此种研究方法是根据近几年来国内外对有关黄芪制剂的研究报告和相关文献进行分类整理和分袖对比,并总结此类黄芪制剂的皂苷结构组成,还有它在结构上具有的特殊结构特点以及HPLC测定方法的技术核心与发展历程。分析讨论结果:随着科技的发展,HPLC的测定设施与软件设备不断更新,理论与技术相辅相成并不断完善,并且种类愈发多的含黄芪制剂皂苷类化合物也可以利用该方法进行检测,更重要的是,此方法具有具有高效、简便、准确的特点。结论:HPLC法可用于黄芪制剂中皂苷类化合物的检测,且有着很好的应用实践价值
1 黄芪的简介
黄芪,是一种豆科多年生的草本类植物,北芪和元芪以及黄耆皆是它的别称。
黄芪的主要分布非常广泛,包括我国黄河沿岸的河北、山东、内蒙、东北等地,而这些地区之中,又以西北和内蒙产地的药用黄芪质量最好。黄芪的根部药用价值极高,是我国从古至今极为推崇的具补血、养气、固本为一体的中药材。它在补虚固表之时,能够疗养人体表冒虚汗或是血气虚亏的体弱病症。而在治疗时,只需要将黄芪与白术以及防风等中药材一起搭配服用,便能起到疗需补亏的效果,并且因搭配白术等药材的原因,治疗效果更为显著有效。不过,在服用黄芪这一味药材时,也是有禁忌的,即感冒中的人与正值经期的女性,皆不宜服用黄芪,另外黄芪不适合在春天服用,不然会让身体的邪毒留在体内不利于病毒的宣发。再就是肾病阴虚湿热以及热过重的人群也不能服用黄芪,不然会让病情加重,不利于身体恢复。
2 黄芪中皂苷类化合物的介绍
2.1黄芪类化合物的化学成分
黄芪之中的碳元素非常丰富,含有蔗糖、葡萄糖醛酸、黄芪多糖A、B、C、D,黏液质、多种氨基酸等多种化合元素及含有硒、硅等多种微量元素。内蒙黄耆脂质的皂化产物中分出亚油酸、亚麻酸;非皂化部分中有β-谷甾醇。而靠近中国的朝鲜,盛产黄膏,他们曾在黄膏中分离出来一种似皂甙的结晶。黄芪的药用价值在药学与医学之中都具有重要的研究与药用价值,这主要归结于黄芪本身便具有的多种药用活性成分,这些成分主要包括一下几种。
2.2 黄芪中皂苷类化合物化学结构
黄芪药材中的皂苷类化合物一般都具有复杂的化学结构,是由结构复杂的皂苷元和葡萄糖、鼠李糖、半乳糖结合而成。目前已经分离得到的黄芪皂苷类化合物主要有:乙酰基黄芪皂苷、异黄芪皂苷(I~II)、黄芪皂苷(I~VIII)、大豆皂苷、三萜皂苷等。
3 含黄芪制剂的种类和特点
《中国药典》是我国对中医古籍的收集与整理编纂而成的一本中医大型典籍,早在它15年版本中就有规定黄芪为:蒙古黄芪(膜英黄芪的干燥根作正品药用。我国广泛应用的中医药材便是黄芪,其有增强机体免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗应激、降压和较广泛的抗茵作用。含黄芪的制剂种类繁多,包括补中益气丸、阿胶补血口服液、贞芪扶正颗粒、乙肝宁颗粒、玉屏风滴丸等。
黄芪药材以及含黄芪制剂的现行质量标准中含量测定多采用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷的含量。采用HPLC-ELSD法,对补中益气丸、阿胶补血口服液、贞芪扶正颗粒三种含黄芪的制剂进行转移率的考察,其中补中益气丸中黄芪甲苷的转移率明显偏高,均高达400%;阿胶补血口服液中黄芪甲苷的转移率为95%左右;贞芪扶正颗粒中黄芪甲苷的转移率为30%,相对较低。补中益气丸为生粉入药,制法相对简单,对其生产的各个环节的半成品及成品的黄芪甲苷转移情况进行研究,考察黄芪甲苷转移率的合理性。
4 HPLC法测定含黄芪制剂皂苷成分的实例
4.1含黄芪制剂HPLC样品制备方法
目前常用的黄芪制剂HPLC样品制备方法有沉淀、过滤、离心、脱脂、结晶、洗涤、再溶解等方法。在有些难以处理制备的样品中,单一的制备方法并不能满足需求,通常可以是多种方法的同时利用以达到制备合乎要求的样品液。封士兰等人在制备黄芪颗粒样品时,先采用溶剂超声法初步提取,然后用有机溶剂萃取分离得到可直接进样的HPLC样品
4.2 HPLC法测定黄芪制剂的应用实例
江宝红在萃取药物的过程中,采用固相萃取系统对肝纤消颗粒进行处理,色谱柱为Alltima C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(33∶67),流速1.0 mL.min-1,柱温35℃,ELSD漂移管温度110℃,载气流量2.7 L.min-1,进样量20μL,通过利用SPE-HPLC-ELSD法测定复方藏药制剂肝纤消颗粒中黄芪甲苷的含量
陈华国的方法则与江宝红不同,他采用的是本文所阐述的HPLC法,利用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),使用甲醇-0.5%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长254 nm。采用外标法,利用毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的混合对照测定其在30批制剂中的含量。
汪祺则是通过改良优化的方式确定成分,即用HPLC液相条件确定特征性成分,以HPLC为基础实现HPLC、UPLC条件转换,最终建立黄芪中黄酮类成分的HPLC、UPLC特征图谱。
5 小结与展望
众所周知,中药药物之中的活性成分极难检测与提取,如屠呦呦,仅青蒿素的提取就花费了数年的时间,归其原因还是在于此类成分结构的复杂与成分的多样性,而黄芪制剂的皂苷成分便更是如此,定性与定量的检测都为药学工作者带来困难。为此药学工作者进行了大量深入的研究,采用了西药检测中常用的HPLC法对黄芪制剂皂苷成分进行了测定,并取得了一定的成果,测定结果的准确性更高,操作更为简便。当然HPLC法在检测时也存在着一定问题,例如当黄芪皂苷结构相类似时,可能难以达到组分间的完全分离,给测定结果带来一定的误差,其次在HPLC法定量时,需要有相应的对照品,但是所有成分的对照品的制备难度依然存在,在缺少对照品时很难对皂苷成分进行准确定量 。有望以后医疗水平更上一层楼。帮病人解决疾病的问题
提高医疗水平。
参考文献
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参考文献
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