含黄芪制剂中皂苷类化合物的HPLC测定方法的概述 (4)(三)

用对照品溶液分别进样10，20，30，4 0，50 μl，按上述色谱条件测定，以峰面积的常用对数为纵坐标（Y），进样量的常用对数为横坐标（X），进行线性回归,得回归方程：Y=1.5341X+7.3418 r= 0.9994。表明黄芪甲苷在0.3～1.5 μg范围内具有良好的线性关系。

2.4 精密度试验

重复进样对照品溶液5次,每次25μl,分别测定峰面积，按上述回归方程计算出进样量，结果RSD=2.00%。

2.5 稳定性试验

精密吸取对照品溶液25μl,每隔4h进样一次,8h内共测定3次,分别测定峰面积,按上述回归方程计算出进样量，RSD=1.28%。

2.6 重复性试验

取样品液，平行取样6份，制成供试品溶液,依法测定,计算黄芪甲苷的含量，结果平均含量为0.0 034％，RSD＝4.23%。

2.7 加样回收率试验

精密称取已测知含量的样品6份,分别精密加入一定量的黄芪甲苷，依法测定，计算回收率,结果平均加样回收率为99.47%，RSD＝3.4 6％(表1)。

3 讨论

ELSD 是高效液相色谱仪新一代通用型质量检测器,其检测样品组分应是 非 挥发性的而流动相应是易挥发的溶剂,其中载气流速和漂移管温度是该检测器 的 2个重要的可调参数,流速过高或过低会直接影响信噪比,从而影响峰面积 和保留时间,而温度过高或过低会直接影响溶剂的挥发程度,以致影响基线的稳定性,因此,在试验中应反复认真进行调试,本实验经反复试验与观察,确定载气流 速为2.0 m L/m i n,漂移管温度为8 3.8℃.所确 立的方法可准确测定该制剂中黄芪甲苷的含量。

作者：沈小玲（广东省轻工业高级技工学校 广东广州 510000）

中图分类号： R284 文献标识码：A 文章编号：1674-098X(2015)01（b）-0036-02

参考文献

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[2] 孔祥瑞．中华医学微量元素研究进展 [M]．乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社，1996:42-44．

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[4] 马晓丰，田晓明，陈英杰等．蒙古 黄芪 中黄酮类成分的研究 [J].中草药，2005，36(9)：1293-1296。

4.2黄芪成分F3新制剂的急性毒性研究

摘要：【目的】研究黄芪成分R新制剂的急性毒性和最太耐受量．I方法】采用小鼠急性毒性试验方法和最大耐受量测定方法 [结果】小鼠腹腔注射黄芪成分F，新制剂的半数致死量(LD。)束测出，其最小耐受量为5非g体重．I结论】黄芪成分F，新制剂是一种毒性作用较小的，有一定开发应用前景的药物。

关键词：黄芪成分F，新制剂：急性毒性；最大耐受量。

中图分类号：R965 文献标识码·A 文章编号：1008—2395(2002)06—0088·02

1材料

（1）药品黄芪成分F，新制剂由本课题组自行提取，试验前浓缩制成可注射的最大浓度(200mg／m1)，备用，试验时按比例稀释．（2）动物昆明种小白鼠(20士2)g，雌雄兼用。由大连大学动物中心提供。

2方法和结果

（1）急性毒性试验‘‘，I预试验取小鼠20只，雌雄各半，随机分为5组，每组4只．受试药物以浓缩液为最高浓度，按l倍法依次稀释．小鼠采用腹腔注射给药，给药体积为0.25 lrd/10 g体重．5个剂量组所给予的药物剂量依次为5 000、2 500、l 250、625、312．5 rng/kg体重．给药后连续观察7日，未见明显的毒性反应，且无l例死亡．因受药物浓度和给药体积的限制，找不出引起小鼠死亡的剂量，故无法测出黄芪成分F，新制剂小鼠腹腔注射的LD∞

（2）最大耐受量测定取小鼠20只，雌雄各半，以药物所能配制的最高浓度(2001珲枷)及允许使用的最大体积(O．25ml／109体重)，一次给予全部小鼠腹腔注射，给药后连续观察14日，小鼠除给药后出现安静、聚集不动的现象外，无明显的中毒反应，14日内无l例死亡．由此测得黄芪成分F，新制剂小鼠腹腔注射的最大耐受量为59／kg体重。

3讨论

黄芪成分F3新制剂是从中药黄芪中提取的、以多糖含量为主的有效成分．本实验采用传统的急性毒性试验方法，对其进行LD。测定，测定方法准确可靠．因考虑到将来拟将其制成注射剂应用。故实验采用腹腔注射的给药途径来观察其毒性大小，但因受药物配制浓度及给药体积所限，未找出该物质一次腹腔注射所能引起小鼠死亡的剂量。故无法测得其LD。．进而用最大耐受量测定方法，测得其最大耐受量为59／kg体重．从这一结果来看，本品的毒性作用还是比较小的．鉴于本课题组对黄芪成分R新制剂的抗肿瘤作用研究结果，以及黄芪本身所具有的多方面的药理功效，我们认为有必要对其进行进一步地开发应用．而本实验的研究结果对黄芪成分R新制剂的深入研究也提供了有价值的实验参考资料。

作者：罗学娅，高卫，伦永志，景立新，赵莲华，曹利力(大连大学医学院，辽宁大连116622)

参考文献

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[4]张均田．现代药理实验方法[M]．北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1998，1818

[5]徐叔云，等．药理实验方法学[M]北京：人民卫生出版社，1982,400

4.3黄芪及其复方制剂含量测定方法