葛根芩连片的含量测定研究进展 (3)(一)

目录

一、国内现行的对葛根芩连片的鉴别方法 1

（一）葛根芩连片中盐酸小檗碱的鉴别方法 1

（二）葛根芩连片中葛根素的鉴别方法 1

（三）葛根芩连片中黄芩苷的鉴别方法 2

二、各文献中葛根芩连片中有效成分的含量测定方法 2

（一）葛根芩连片中葛根素的含量测定方法 2

（二）葛根芩连片中盐酸小檗碱的含量测定方法 3

（三）葛根芩连片中黄芩苷的含量测定方法 3

三、结论 3

四、参考文献 4

摘要：葛根芩连片主要成份：葛根、黄芩、黄连、炙甘草功能主治：解肌清热，止泻止痢。用于泄泻痢疾，身热烦渴，下利臭秽。。根据现代研究表明盐酸小檗碱、葛根素、黄芩苷为葛根芩连片中的有效成分。本文结合其他相关文献利用照薄层色谱发鉴别葛根芩连片中的有效成分，利用薄层扫描法、RP-HPLC、HPLC等方法测定葛根芩连片有效成分的含量。

关键词：葛根素；盐酸小檗碱；黄芩苷；HPLC

  葛根芩连片，为清热剂，具有解肌清热，止泻止痢之功效。主治泄泻痢疾，身热烦渴，下痢臭秽；菌痢、肠炎。方中重用葛根发表解肌，升发脾胃清阳，是为君药；黄芩、黄连清肠胃之热邪，是为臣药；甘草甘缓和中，并能调诸药，是为使药。诸药配合成方，共奏解表清里之功。相关制剂在 2015 年版《中国药典》［1］中收载，葛根素为葛根质量控制的主要成分，对其提取及含量测定方法进行研究具有重要意义近年来，随着处方组成的多样化，仪器的更新，新的测定方法不断出现，笔者查阅了近几年国内外资料，选出比较使用的鉴别方法和测定方法，综述如下:

一、国内现行的对葛根芩连片的鉴别方法

（一）葛根芩连片中盐酸小檗碱的鉴别方法

根据中国人民共和国药典2015年版［1］取本品2片，研细，加甲醇10ml，超声处理15分钟，滤过，取滤液1ml，用甲醇稀释至5ml，作为供试品溶液。另取黄连对照药材0.1g，加甲醇10ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液（12:6:3:3:1）为展开剂．置氨蒸气预饱和15分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

（二）葛根芩连片中葛根素的鉴别方法

取本品4片，研细，加乙酸乙酯25ml。超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取葛根素对照品，加无水乙醇制成每1m1含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液5μl、对照品溶液2μl．分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（28:10:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏15分钟，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上。显相同颜色的荧光斑点。

（三）葛根芩连片中黄芩苷的鉴别方法

取本品4片，研细，加甲醇30ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加盐酸调节pH值至3.0-3.5，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一以含4％醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5:3:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

二、各文献中葛根芩连片中有效成分的含量测定方法

（一）葛根芩连片中葛根素的含量测定方法

葛根芩连片由葛根、黄芩、黄连、炙甘草 & 味中药材组成，具解肌清热、止泻止痢之功效，临床用于泄泻痢疾、身热烦渴、下利臭秽等症。 根据山东日照市药品检验所 宋金荣 的研究方法［2］表明为检测葛根芩连片中葛根素的有效方法：薄层扫描法采用的固定相为硅胶GF254，流动相：氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水（14：6：3：1），参比波长370nm，测定波长254nm。得出结果：葛根素在0.5-2.5μg范围内呈现良好的线性关系（r=0.9992），平均回收率97.99％，RSD为2.10% ).6 。结论：本法简便、快速、准确、重现性好，可作为葛根芩连片的质量控制方法。

谭 生 建 郑 夏等采用P一HPL 测 定葛根等连 片中葛根 素含量。［3］采用Shim-pack CLC-ODS(15cm×6mmID)分析柱；北分厂ODS保护柱；流动相：甲醛-水（２３：７７）；流速：１.０ｍｌ/ｍｉｎ；色谱柱温度：３５℃；检测波长：２５０ｎｍ；进样体积μ１；外标法计算含量。理论板数按葛根素峰计算不低于２０００；葛根素浓度在５μg/ｍｌ-８０μg/ｍｌ范围与色谱峰面积呈线性关系；Ｒ＝０.９９９９，回收率及ＲＳＤ分别是９７.６％，１.８％。