山楂中黄酮类化合物的测定方法概述
4山楂中黄酮类成分测定实例
实例1 袁冬梅等人[[[]袁冬梅, 李一婧. 山楂叶中黄酮含量的高效液相色谱法测定[J]. 中国酿造, 2007(12):66-68.]]将山楂叶粉末置在90℃~100℃热水中,分别用30%、50%、70%、80%乙醇溶液浸泡,在一定温度下冷凝回流2h后抽滤,过0.22μm滤膜后进行HPLC分析。色谱条件为:C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇水(6040),柱温为室温,流速为1.0mL/min,检测波长为365nm。结果发现山楂叶中槲皮素、牡荆素和异鼠李素的含量分别为3.69mg/g、7.98mg/g、2.02mg/g,回收率分别为99.03%、96.28%、100.19%。该提取和测定方法经济适用、效果好,而且具有简单、准确、快速等优点。
实例2 王珍等人[[[]王珍, 李秀霞, 李娇,等. 高效液相色谱法测定山楂中芦丁、金丝桃苷和槲皮素的含量[J]. 食品工业科技, 2013, 34(9):302-305.]]以70%乙醇为提取溶剂,采用Develosil C30色谱柱(250mm×4.6mm,5um)分离,以乙腈和0.4%磷酸水溶液为流动相,流速1.0ml/min,检测波长360nm,采用峰面积和保留时间对3种山楂总黄酮提取物中芦丁、金丝桃苷和槲皮素三种化合物进行分析。结果表明:这3种黄酮在30min内分离较好,质量浓度分别为0.0050~0.1600mg/mL、0.0016~0.0500mg/mL和0.0005~0.0150mg/mL时与峰面积线性关系良好,相关系数分别为0.9999、0.9996和0.9997。该方法的回收率达到92.36%~98.64%,说明该HPLC分析方法可用于山楂果粉等干植物中芦丁、金丝桃苷和槲皮素这3种黄酮类化合物的精确定量。
实例3 仲英等人[[[]仲英, 杨尚军, 王菊,等. 高效液相色谱法测定山楂叶总黄酮中牡荆素含量[J]. 时珍国医国药, 2000, 11(10):871-872.]]应用反相高效液相色谱法测定了山楂叶总黄酮中牡荆素的含量。他们以甲醇-25%盐酸(4:1)为溶剂溶解山楂叶总黄酮,水浴加热40min,降温、挥干,残渣加流动相溶解、稀释后作为供试品溶液。具体色谱条件为:色谱柱为WatersC18柱(8mm×100mm);柱温为室温,流动相为乙腈-3%醋酸水(11:89);流速1.2ml/min;纸速0.25cm/min;检测波长270nm;保留时间7.7~7.8min。按外标法定量 。结果发现:样品经提取分离水解后6次平均加样回收率为99.09%,重现性试验的RSD=3.66%。提示:该HPLC为山楂叶总黄酮提供了准确、灵敏的含量测定方法。
5总结
综上所述,山楂中含有丰富的黄酮类化合物。山楂不仅具有消食导滞、行气散瘀等传统功效,而且还有改善心血管功能、降血压、降血脂、抗氧化、抗肿瘤、保护肝脏、保护肾脏等多种作用。而这些均与山楂中丰富的黄酮类化合物有关。采用HPLC等分析手段可高效、快速地分析、鉴定山楂中不同的黄酮类化合物成分及含量。这将为山楂用于心血管疾病、慢性代谢综合征、肿瘤等多种疾病的新药开发提供基础。
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